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亲和层析的特殊应用

亲和层析的特殊应用

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  • 发布时间:2022-08-12 09:52
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【概要描述】  亲和色谱也称为亲和层析,是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和层析是将具有一定结合能力的分子连接到凝胶过滤层析柱上待分离的物质上,它们的结合是可逆的,当流动相条件改变时,它们可以相互分离。亲和层析可用于从混合物中纯化或浓缩分子,或者去除或减少混合物中分子的含量。

亲和层析的特殊应用

【概要描述】  亲和色谱也称为亲和层析,是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和层析是将具有一定结合能力的分子连接到凝胶过滤层析柱上待分离的物质上,它们的结合是可逆的,当流动相条件改变时,它们可以相互分离。亲和层析可用于从混合物中纯化或浓缩分子,或者去除或减少混合物中分子的含量。

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  亲和色谱也称为亲和层析,是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和层析是将具有一定结合能力的分子连接到凝胶过滤层析柱上待分离的物质上,它们的结合是可逆的,当流动相条件改变时,它们可以相互分离。亲和层析可用于从混合物中纯化或浓缩分子,或者去除或减少混合物中分子的含量。

  一般流程

  亲和层析分离的物质通常混合在溶液中,如细胞内容物、培养基或血浆等。待分离的分子通过色谱柱时,被固定相或介质上的基团捕获,而溶液中的其他物质可以顺利通过色谱柱。然后取出固体基质洗脱,目标分子立即洗脱。如果分离的目的是去除溶液中的一些分子,那么只要分子能与介质结合,就不需要洗脱。在再生过程中,调整流动相以洗脱杂质。

  特殊应用

  亲和层析用途广泛,可用于从细胞提取物中分离和纯化核酸和蛋白质,也可用于从血浆中分离抗体。亲和层析常用于分离重组蛋白。通过基因修饰,给蛋白质添加一些人工特性,使蛋白质选择性地与配体结合,从而达到分离的目的。亲和层析的另一个重要用途是从血浆中分离抗体。

  亲和层析介质应具备以下四个条件:①多孔网络结构②低非特异性吸附,基质化学性质惰性,表面电荷低;(3)理化性质稳定,不会因共价偶联反应条件和吸附条件的变化而改变;④底物必须是活化的或有功能的。


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